PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)備整體解決方案
針對中央要求各地要結(jié)合新冠疫情防控和檢測需求，加強(qiáng)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)。三級(jí)綜合醫(yī)院均應(yīng)當(dāng)建立符合生物安全二級(jí)及以，上標(biāo)準(zhǔn)的臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室,具備獨(dú)立開展新型冠狀病毒檢測的能力;各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)和有條件的?？漆t(yī)院、二級(jí)醫(yī)院、獨(dú)立設(shè)置的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室也應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，提高檢測能力。對醫(yī)療資源相對缺乏、檢測能力相對薄弱、疫情防控壓力較大的地區(qū),特別是陸路邊境口岸,要選擇1家綜合實(shí)力強(qiáng)的縣級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)予以重點(diǎn)支持，實(shí)現(xiàn)縣域內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)具備核酸檢測能力。
臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR 實(shí)驗(yàn)，是專門用來檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗(yàn)難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。但是，這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來對臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來越得到重視，因?yàn)樗鼘z測結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局，PCR實(shí)驗(yàn)室基本流程進(jìn)行了介紹。
PCR實(shí)驗(yàn)室布局
試劑制備室
功能：該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑
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品類 |
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推薦品牌 |
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超凈工作臺(tái) |
涉及對細(xì)菌的操作均需要在超凈工作臺(tái)完成 |
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純水機(jī) |
清洗以及溶液配制、樣品培養(yǎng)等 |
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天平 |
稱量，試劑配制 |
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消毒車 |
空間消毒 |
樣本制備區(qū)
功能:臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提職、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時(shí)DNA 的合成。
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品類 |
選型用途 |
推薦品牌 |
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生物安全柜 |
為了防止有害懸浮微粒、溶膠的擴(kuò)散 |
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高速離心機(jī) |
濃縮法:高速離心過柱 |
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高速臺(tái)式冷凍離心機(jī) |
用于收集微生物苗體、細(xì)胞碎片以及其他沉淀物。有些樣 品由于在常溫下不太穩(wěn)定，需要低溫環(huán)境。 |
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水浴箱 |
樣本56度滅活 |
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移液器 |
準(zhǔn)確里取特定體積溶液 |
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紫外燈/消毒車 |
空間環(huán)境消毒 |
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混勻儀 |
移取樣本前需要混勻 |
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金屬浴 |
用于DNA雜交過程中控溫 |
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八連管離心機(jī) |
PCR體系瞬時(shí)離心 |
※核酸擴(kuò)增區(qū)
功能:主要是DNA擴(kuò)增、已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應(yīng)混合液，制備成反應(yīng)混合液等，也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在PCR測定中，通常在擴(kuò)增后須打開反應(yīng)管。
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品類 |
選型用途
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推薦品牌
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熒光定里PCR儀 |
核酸定里分析 |
博樂/羅氏
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核酸取儀 |
樣品DNA/RNA提取
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碩世/天隆/圣湘 |
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移液器
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準(zhǔn)確重取特定體積溶液
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紫外燈/消毒車 |
空間環(huán)境毒 |
※產(chǎn)物分析區(qū)
功能:主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定,如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測，此區(qū)域可不設(shè)。
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品類 |
選型用途 |
推薦品牌 |
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電泳儀 |
水平電泳用于核酸DINA/RNA檢測，垂直電泳用于蛋白檢測，轉(zhuǎn)印電泳用于將蛋白轉(zhuǎn)印到膜上做western檢測 |
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凝膠成像系統(tǒng)/紫外檢測儀 |
用于核酸瓊脂電泳和蛋白聚丙酰胺的觀察和拍照;紫外分析儀用于染色后核酸瓊脂電泳膠觀察，不能連接電腦， |
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電爐 |
電泳瓊脂凝膠加熱融化 |
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